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為什么多糖的純度和核磁緊密相關?

核磁掃描圖譜反映的是樣品中所有原子信號的總和,且信號的強弱與其含量有關。如果多糖純度低,其中的雜質信號會干擾多糖的信號,含量越高信號越強。一般來說,根據多糖的特征核磁信號可推測多糖的主要結構,但雜質含量較高時,可能會影響部分糖殘基的信號,導致多糖結構推測的難度變大、準確度降低。


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多糖甲基化結果中,糖醛酸這個是怎么得到的?

中性糖和酸性糖的差異在羧基,樣品分別經硼氫化鈉和硼氘化鈉還原后,H 代和 D 代的部分質荷比(m/z)不同(兩者相差 2),因此比較 H 代和 D 代二級碎片質荷比的差異變化及其峰面積和占比,可以實現糖醛酸的定性和定量。同時結合單糖組成的結果進行輔助判斷和驗證。

舉例:4-Gal(p)-UA

根據 RT 分別找到氫代和氘代的二級碎片圖,進行比對



???

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酸性甲基化有氫代和氘代兩個二級碎片圖,文章客戶用哪個圖?

可根據文章需求和目標期刊近 5 年發文情況進行調整。隨著多糖甲基化檢測普遍化,一般來說常見類型有三種:a、僅放糖苷鍵分析結果(近 3 年發文最多,兩張總離子流圖和對應二級質譜圖均作為補充材料)b放 1 張圖+糖苷鍵分析結果(發文量其次,其余均作為補充材料,優先選擇樣品信號強度高的圖譜);c、放 2 張圖+糖苷鍵分析結果(發文量較少,其余均作為補充材料)。


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多糖甲基化結果中,二級碎片圖的個數>糖殘基的個數,原因是?

二級碎片圖為 TIC 中所有峰的二級碎片圖(含糖殘基的二級譜圖以及雜質的二級譜圖),

所以二級碎片圖會多于糖殘基的個數。


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多糖甲基化結果中,TIC 圖上是否可以標注出峰對應的殘基名稱?

TIC 圖為軟件直接導出的結果,無法標峰,需要標峰的老師可以依據提供的 excel 表來標峰。


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