服務簡介
標記蛋白質組學目前主要是iTRAQ(Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation)和TMT(Tandem Mass Tags)技術,分別由美國AB Sciex公司和Thermo公司研發的多肽體外標記定量技術,采用不同數量同位素標簽(iTRAQ 4/8標,TMT 6/10/16),通過特異性標記多肽的氨基酸基團,一次上機可實現最多15個不同樣本中蛋白質的相對定量,是近年來定量蛋白質組學常用的高通量篩選技術。三黍生物公司采用Thermo Fisher的Q Exactive /Q Exactive Plus/Q Exactive HF/ Q Exactive HFX質譜平臺結合Nano-LC,推出基于標記定量蛋白組分析技術服務。
應用領域
生長發育研究
疾病發生機制研究
藥理學機制研究
生物標志物研究
疾病分子分型研究
技術路線


研磨稱量


蛋白抽提


酶解純化


上機檢測


搜庫比對


數據分析


出具報告
技術優勢
高平行性:同一批次樣本統一處理實驗平行性較高
高準確性:借助于標簽檢測,靈敏度好以及定量準確性高
高通量:結合分級處理大大提高蛋白鑒定深度
樣本要求
1、樣品類型
動物組織;細胞;微生物(細菌/真菌);液體類(血液/尿液/腦脊液/灌洗液/關節液等)。
2、生物學重復
建議3次及以上生物學重復。
3、樣品需求量
動物組織≥200mg;細胞≥107;微生物(細菌/真菌)≥200mg;液體類≥2.5ml;特殊情況請于公司聯系。
4、樣品準備
樣本準備基本原則有:代表性原則;迅速性原則;分裝備份原則;污染控制原則;低溫原則。公司可提供詳細的樣本準備和運輸指南。
5、保存和運輸
樣本用液氮速凍,-80度保存或者直接干冰寄送即可。
6、樣品標記要求
樣品標記清晰,盡量使用英文和數字組合,字符數在15個以內為好。同時按照公司的技術需求表填寫樣本詳細信息。
7、其他
客戶認真填寫公司的技術需求表,務必隨樣品一起郵寄,由于表格信息不全造成的損失由客戶自行承擔。
結果示例
部分分析結果示例
參考文獻
1) Relative Protein Quantification Using Tandem Mass Tag Mass Spectrometry.
2) Simultaneous analysis of relative protein expression levels across multiple samples using iTRAQ isobaric tags with 2D nano LC–MS/MS.
3) iTRAQ-based quantitative proteomic analysis for identification of biomarkers associated with emodin against severe acute pancreatitis in rats.