鏈長分布
在淀粉的層次結構中（圖1），鏈長分布(CLD)是一級結構的重要特征，是更高層次結構的基礎，也是淀粉理化性質的基礎1 2。結合以往對淀粉精細分子結構的認識，對直鏈淀粉以及支鏈淀粉精細結構的理解及深入研究，是全面理解淀粉構效的重要條件。
目前對淀粉的鏈長分布的測定方法有很多種，主要有：凝膠層析法、高效體積排阻色譜法、高效陰離子交換色譜-脈沖安倍檢測法、DNA測序儀的熒光糖電泳等，這些檢測方法對支鏈淀粉的檢測范圍和檢測精度都存在一定差異。小編本次主要針對目前主流的兩種方法，即高效體積排阻色譜法、高效陰離子交換色譜-脈沖安倍檢測法來進行介紹。
圖1.淀粉的6個層級。（層級1：單獨的分支；層級二：直鏈淀粉/支鏈淀粉；層級三：結晶區/無定形區片層；層級四：生長環；層級5：淀粉顆粒；層級6：籽粒）
什么是離子色譜？
高效陰離子交換色譜一脈沖安培檢測法(high-performance anion exchange chromatography with pulsed amperometric detection, HAPED-PAD)是至今較為成熟的支鏈淀粉鏈長分布測定方法3 4。20世紀80年代以來，該方法廣泛應用于糖類的分析，屬于糖類檢測的首選方法。該方法具有在強堿性條件下靈敏度高、有機溶劑兼容性好以及無需衍生等特點5，分離特定聚合度下的各個色譜峰，即對葡萄糖鏈的分布進行測定，從而成為檢測支鏈淀粉鏈長分布的一種重要方法。支鏈淀粉作為多糖，也可使用該方法6。
離子交換的原理為：以有機離子交換樹脂為填料類型，采用低交換容量的離子交換樹脂來分離離子，苯乙烯二乙烯苯共聚體為骨架，在苯環上引入叔胺基而成季胺型強堿性陰離子交換樹脂，該類交換樹脂具有多孔或薄殼型或大孔表面層型的物理結構，以便于快速達到交換平衡。
圖2.離子色譜工作原理
通過離子交換法可以準確的得到支鏈淀粉鏈長分布圖，并且可以得到單個色譜峰分子聚合度的準確信息，檢測范圍為DP6-DP76，因此只能關注到支鏈淀粉鏈長分布信息。
什么是凝膠色譜？
凝膠滲透色譜法(Gel permeation chromatography, GPC)，或稱高效分子排阻色譜法（High Performance size-exclusion Chromatography， HPSEC），是利用凝膠排阻色譜將不同分子尺寸的直鏈淀粉和支鏈淀粉進行分離。用異淀粉酶將淀粉脫分支后，通過對比支鏈淀粉和直鏈淀粉的峰面積可得出直鏈淀粉的百分含量，采用該方法測定直鏈淀粉含量準確度高，可同時測定直鏈淀粉和支鏈淀粉含量7。但是凝膠色譜也存在一定的缺點，例如，通過液相系統以非常高的壓力對高分子質量或高分子鏈施加壓力可能會導致高分子鏈降解，產生片面的結果。因此，因凝膠色譜在校準方面的局限以及剪切力的影響，在測定脫分支后的支鏈淀粉不如離子色譜來的準確。
圖3.SEC的峰加寬效應
離子色譜和凝膠色譜該怎么選？
通過上面的描述，相信各位應該能很快的總結出來，針對支鏈淀粉的鏈長，我們更推薦用離子色譜的方法來測定，而直鏈淀粉的鏈長，用凝膠色譜來測定則更加合適。
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參考文獻
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