研究對(duì)象：裸鼠

技術(shù)方法：中藥入血分析，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

技術(shù)路線：

1.YXC 抑制 HCC 腫瘤在體內(nèi)生長(zhǎng)

作者首先通過(guò)裸鼠肝臟腫瘤異種移植模型，發(fā)現(xiàn)YXC治療28天后，小鼠的肝臟腫瘤體積和肝臟重量都較小，體重升高（圖1A-D）。除此之外，造模組細(xì)胞腫瘤細(xì)胞核異常增大，細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)深染，治療后細(xì)胞分布散亂，瘤細(xì)胞密度、有絲分裂和異型性降低（圖1E）。

因此，YXC有體內(nèi)抗腫瘤的效果。

圖1 YXC抑制肝異種移植腫瘤模型中的腫瘤生長(zhǎng)

2.YXC的體內(nèi)成分分析

通過(guò)LC-MS分析藥物成分結(jié)果如圖2-3所示，萜類、黃酮類和羧酸類化合物的數(shù)量高于其他化合物，分別占 49%、13%和 9%。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)果表明，與HCC有關(guān)的共8168個(gè)靶點(diǎn)，其中有141個(gè)高度相關(guān)基因。

圖2 血清樣本的BPC分析

圖3 YXC的入血成分-疾病分析

圖4 PPI網(wǎng)絡(luò)分析

GO和KEGG分析展示了20個(gè)與HCC關(guān)聯(lián)的通路，結(jié)果顯示，癌癥、細(xì)胞凋亡、PI3K/Akt信號(hào)通路和AMPK通路與疾病進(jìn)展相關(guān)（圖5）。

圖5 藥物疾病靶點(diǎn)的GO和KEGG分析

3.YXC在體外抑制HCC細(xì)胞生長(zhǎng)

在體外實(shí)驗(yàn)中，作者用不同濃度的YXC處理HCC細(xì)胞，結(jié)果顯示YXC以劑量依賴性方式降低了MHCC97H、 HCCLM3、HpG2 和 Huh7 細(xì)胞的存活率，在劑量高于10mg/mL時(shí)觀察到細(xì)胞存活率顯著降低（圖6A），與對(duì)照組相比，YXC處理后，集落形成被抑制，凋亡水平升高，遷移和侵襲水平也被抑制（圖6B-E）。

這些數(shù)據(jù)證明了YXC在體外對(duì)HCC細(xì)胞的抑制作用。

圖6 YXC對(duì)HCC的抑制作用

4.YXC的HCC治療作用可能與細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)有關(guān)

基于網(wǎng)藥結(jié)果，作者推測(cè)細(xì)胞凋亡相關(guān)通路可能參與YXC的治療機(jī)制。結(jié)果顯示，YXC組的p53水平和裂解Cas-3/Cas-3的比例顯著更高（圖7A-B）,YXC處理48h后，Bcl-2水平降低，Bax水平高于模型組。

這些數(shù)據(jù)證實(shí)了凋亡通路誘導(dǎo)的發(fā)生，表明凋亡是YXC抑制HCC進(jìn)展的關(guān)鍵作用機(jī)制。

圖7 YXC對(duì)HCC的抑制作用